Определение биохимических показателей крови

Цель: научить определять общий билирубин в сыворотке крови и интерпретировать полученные результаты.

 

Задачи обучения:

1.знать принцип метода определения билирубина в сыворотке крови;

2.уметь составлять алгоритм проведения анализа;

3.уметь определять билирубин в сыворотке крови;

4.знать диагностическую ценность данного анализа;

5.уметь интерпретировать полученные результаты.

 

Основные вопросы темы:

1.Схема образования билирубина.

2.Норма уровня билирубина в сыворотке крови.

3.Прямой и непрямой билирубин,

4.Схема метаболизма билирубина.

5.Принцип метода определения билирубина в сыворотке крови.

6.Диагностическое значение определения билирубина в сыворотке крови.

 

Методы обучения – лабораторная работа.

 

Принцип метода определения билирубина в сыворотке крови – билирубин вступает в реакцию азосочетания с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием раствора азокрасителя. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации билирубина в образце и измеряется фотометрически.

Для анализа используется негемолизированная сыворотка крови или плазма (гепарин, ЭДТА).

Проведение анализа на определение общего билирубина:

Отмерить (мл)Контроль 1Контроль 2Проба
Реактив 10,200,200,20
Реактив 40,050,05
Реактив 31,001,001,00
Физ. раствор0,200,05
Сыворотка крови0,200,20

Взять три пробирки, приготовить по приведенной схеме исследуемые растворы, перемешатть, через 10-50 мин добавить во все три пробирки по 1,0 мл реактива 2, перемешать и через 5-60 мин измерить оптическую плотность пробы (А1),контроля 2  (А2), относительно контроля 1 при длине волны 580-620 нм в кюветах на 1см. Анализ проводят при комнатной температуре.          Расчет: билирубин в сыворотке крови (мкмоль/л) определяют по калибровочному графику.Для расчета берут разность оптических плотностей пробы и контрольного раствора 2 (А1_2).

Нормальные величины билирубина в сыворотке крови (мкмоль/л):

Общий билирубин                                                  до 20,5

Прямой билирубин                                                 до5,1

Диагностическое определение билирубина в сыворотке крови.

Важный субъективный признак нарушения пигментного обмена – желтуха, которая проявляется обычно при уровне билирубина в крови 27 – 34 мкмоль/л. Причины гипербилирубинемии:

1-усиление гемолиза эритроцитов;

2-нарушение функции гепатоцитов;

3-задержка оттока желчи.

Легкая форма желтухи – уровень билирубина в крови не выше 85 мкмоль/л;

Среднетяжелая – 86 – 169 мкмоль/л; тяжелая свыше – 170 мкмоль/л.

При паренхиматозной (печеночной) желтухе в крови преобладают моноглюкурониды билирубина. Повышается в крови связанный билирубин, что приводит к его появлению в моче. Повышен и неконьюгированный билирубин. При обтурационной (подпеченочной) желтухе в крови резко увеличивается коньюгированный билирубин. При гемолитической (надпеченочной) желтухе в крови повышается неконьюгированный билирубин.

Результаты занести в тетради, сравнить с нормальными показателями, сделать выводы.

 

Литература:

1.Тапбергенов С.О.  Медицинская биохимия.- Астана, 2001,с.228.

2.Березов Т.Т.,  Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.- М.,2005,с.434.

3.Биохимия, под ред. Чл.-корр. РАН, проф. Е.С. Северина.- М.,2005,с.16, 646.

  1. Николаев А.Я. Биологическая химия.- М.,2004, с.462.

5.Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике.-Минск, 2000, т.2,с.230.

Контрольные вопросы:

Принцип метода определения билирубина в сыворотке крови.

Пути образования билирубина.

Как происходит образование прямого билирубина?

Қажетті материалды таппадың ба? Онда KazMedic авторларына тапсырыс бер

Определение биохимических показателей крови

error: Материал көшіруге болмайды!